申请号 | CN202411415805.2 | 公开号 | CN119161487A |
申请日 | 2024.10.11 | 公开日 | 2024.12.20 |
申请人 | 江苏海洋大学 | 优先权日期 | |
发明人 | 胡广伟;范梦昊;程伟涛;姬南京;刘德雪;韩婉钰; | 主分类号 | C07K16/40(2006.01) |
申请人地址 | 江苏省连云港市海州区苍梧路59号 | 分类号 | C12R1/19 |
专利代理机构 | 南京苏高专利商标事务所(普通合伙) | 当前专利状态 | 授权未下证 |
代理人 | 孙斌 | 有效性 | 有效 |
法律状态 | 未授权 |
本发明公开了一种脊尾白虾AMPKα蛋白多克隆抗体及其制备方法与应用,所述脊尾白虾AMPKα蛋白多克隆抗体的制备方法,包括构建含有如SEQ ID NO.1所示AMPKα目的基因片段的重组表达载体pET‑22b‑AMPKα;将重组表达载体转化至大肠杆菌并诱导表达融合蛋白,收集并纯化后得到AMPKα重组蛋白,重组蛋白为含有氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示的AMPKα重组蛋白;将AMPKα重组蛋白作为抗原进行免疫处理,纯化后获得脊尾白虾AMPKα蛋白多克隆抗体。本方法制备的脊尾白虾AMPKα多克隆抗体效价高,能特异识别出脊尾白虾鳃组织AMPKα,能够较好应用于脊尾白虾生物学免疫检测。展开
[中文] 1. 一种脊尾白虾AMPKα蛋白多克隆抗体的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:(1)构建含有如SEQ ID NO.1所示AMPKα目的基因片段的重组表达载体;(2)将重组表达载体转化至感受态细胞并诱导表达融合蛋白,收集并纯化后得到AMPKα重组蛋白;(3)将AMPKα重组蛋白作为抗原进行动物免疫处理,收集分离抗血清,纯化后获得脊尾白虾AMPKα蛋白多克隆抗体。 2. 根据权利要求1所述的脊尾白虾AMPKα蛋白多克隆抗体的制备方法,其特征在于,步骤(1)所述SEQ ID NO.1所示的AMPKα目的基因片段重组于pET-22b(+)载体的双酶切位点之间。 3. 根据权利要求1所述的脊尾白虾AMPKα蛋白多克隆抗体的制备方法,其特征在于,步骤(2)所述诱导表达融合蛋白的方法为:将构建的重组表达菌株挑取至LB液体培养基中培养,至菌液浓度OD 600为0.6-0.8后加入IPTG培养,诱导融合蛋白表达4-16h。展开
专利技术附图




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卖家 | 企业营业执照 专利注册证原件 | 身份证 专利注册证原件 |